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Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞

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产品名称: Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞
产品型号: 11811YB80
产品展商: YBscience
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简单介绍

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,适合于多种插入片段的化学转化 , Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞使用pUC19质粒检测,转化效率可达109cfu/μg。


Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞  的详细介绍

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞


产品描述


Stbl2是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,适合于多种插入片段的化学转化。具有以下特点:

 更适于不稳定插入片段(正向重复序列,逆转录病毒序列等)的克隆;

 更适于克隆慢病毒载体、甲基化的基因组序列;

 利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;

 不存在lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。

本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达109cfu/μg

本品基因型:F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB) 

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞产品组分

编号

组分

规格

保存温度

11811-A

 Stbl2 感受态细胞

100 μl × 10

-80

11811-B

pUC1910pg/μl

10 μl × 1

-20

运输与保存方法

干冰运输。

 Stbl2 感受态细胞-80保存,pUC19质粒-20保存。有效期半年。

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞注意事项

1)感受态细胞应保存在-80,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化学感受态细胞使用方法

1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

【注】:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用,应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

2)向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置25min

3)置于42水浴中热激45 s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。

4)向离心管中加入900μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于30摇床振荡培养90min225rpm),目的是促使菌体复苏。

【注】:当质粒中含有不稳定片段时,30培养可降低错误重组的概率,若转化Control pUC19 计算转化效率,则需37225 rpm复苏60min

5)将上述复苏的菌液于5000rpm离心1min,留取100μl左右上清轻轻混匀菌液并涂布到含相应抗生素的SOC培养基上。

6)将平板倒置放于30培养箱过夜培养。

【注】:若转化control pUC19 计算转化效率,则需37培养过夜。

 附录二 SOC培养基配方

2% Tryptone

0.5% Yeast Extract

10mM NaCl

2.5mM KCl

10mM MgCl2

10mM MgSO4

20mM Glucose

NaOH pH7.0

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