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DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞

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产品名称: DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞
产品型号: 11802YB80
产品展商: YBscience
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简单介绍

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。 DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性。


DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞  的详细介绍

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞


产品描述

本品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性。

DH5α感受态细胞基因型:F-φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-arg ) U169 endA1 recA1 hsdR17 (rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞产品组分

编号

组分

规格

11802-A

DH5α感受态细胞

100 μl × 10

11802-B

pUC190.1 ng/μl

5 μl × 1

运输与保存方法

干冰运输。

DH5α感受态细胞-80℃保存,pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞注意事项

1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。

2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。

3)为确保*高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。

 

4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,*低化实验可能遇到的风险。

DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞使用方法

1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

【注】:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用,应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

2)向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min

3)将离心管置于42℃水浴中放置45s~60s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。

4 向离心管中加入900μl无菌的SOCLB培养基(不含***),混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min~60min150 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。

5)将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应***的SOBLB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37培养12-16 h

 

【注】:涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存,一周之内可重新涂板。


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